O ensaio imunofluorescência consiste na reação de anticorpos presentes nos soros ou plasmas antígenos solúveis e purificados obtidos a partir de cultura in vitro.
Os antígenos obtidos são previamente processados e envasados e rotulados para sensibilização em lâminas de imunofluorescência e fixadas nos poços das lâminas demarcados por uma estampa em forma de orifício. Caso as amostras possuam anticorpos específicos, estes irão se ligar aos antígenos fixados nos orifícios.
Numa etapa seguinte, utiliza-se um anticorpo anti-imunoglobulina humana (Ig) conjugada com isotiocianato imunofluorescência de fluoresceína, para evidenciar a reação.
A leitura é realizada com auxílio de microscópio para imunofluorescência que utiliza incidência de luz ultravioleta, sendo considerados reagentes os soros que apresentarem fluorescência e não reagentes os soros que apresentarem ausência de fluorescência, tomando-se como referência os soros controle positivo e negativo que devem ser incluídos em cada lâmina.